儀器介紹

實驗目的：

檢測受試物是否引起哺乳動（dòng）物骨（gǔ）髓細胞染色體畸變,以評價受試物致突變（biàn）的可能性

實驗概述：

染色體（tǐ）是細胞核中具有特殊結構和遺傳功能的（de）小體,當化學物質作用於細胞周期G1期和S期時誘發染色體型畸變,而作用（yòng）於G2期時則誘發染色單體型畸變。給試驗的大、小鼠腹腔注入（rù）秋水仙素（sù）抑製細胞分裂時紡錘絲的形成（chéng）,以增加中期分裂相細胞的比（bǐ）例,並使染（rǎn）色體絲縮短、分（fèn）散、輪廓（kuò）清晰。在顯微鏡下觀察染色體數目和形態。本方法特別適用於需考慮體內代謝活化後的染色體畸變分析。若有證據表明受試物或其（qí）代謝產物（wù）不能到達骨髓,則不適用於本方法（fǎ），

應用範圍

應用（yòng）於科研、農業、衛生、教育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等（děng）各個（gè）領域

符合標準：

GB/T 15670.16-2017《農（nóng）藥登記（jì）毒理學試驗方法第16部分:體內哺（bǔ）乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗》

二、試驗流程

1）動物（wù）選擇（zé）:常用齧齒類動物（大鼠或小鼠），通常每組至少5隻/性別。

2）給藥方案:

單次給藥:通常在采樣前12-48小時（shí）給藥（yào）（覆蓋（gài）細（xì）胞周期）

多次給藥（yào）:若受試物代謝或毒性需重複暴露。

3.陽性對照:已知致畸變（biàn）劑（如環磷酰胺）

4.陰（yīn）性（xìng）對照:溶劑對照（如生理鹽水或DMSO）

5.采樣時（shí）間:通常（cháng）在給（gěi）藥後24小時和48小時采集骨髓細（xì）胞（覆蓋不同細胞周期階段）

6.染（rǎn）色體製備:

處死動（dòng）物後取出骨髓細（xì）胞。

用秋水仙素（Colchicine）處理（lǐ），阻斷細胞分裂於中期。低滲處（chù）理（lǐ）、固定、製片並染色（如Giemsa染色）

7.鏡檢分析:

觀察至少200個中期分裂相/動物，記錄畸變類型和頻率，

區分染色體型（xíng）畸變（如雙著（zhe）絲粒（lì）體）和染（rǎn）色（sè）單體型畸（jī）變（如斷（duàn）裂）

三、結果判定

1）劑量相關性:畸變率隨劑量增加而升高。

2）統計學差異:試驗（yàn）組畸變率顯著高於陰（yīn）性對照組（zǔ）(如p<0.05)

3）生（shēng）物學意義:需（xū）結合曆史對照數據和（hé）畸變類型綜合評估。