一、 儀器（qì）介紹

實驗目（mù）的：

本試驗是一項生殖細胞致（zhì）突變試驗,用來檢測受試物對整體哺乳動物生殖（zhí）細胞的（de）遺傳損傷,進一步確證體外（wài）試驗或其（qí）他試驗係統獲得（dé）的陽性結果,以評價受試物能否引起顯性致死突變。

實驗概述：

哺乳動物發育中的精子在物理或化學因素作（zuò）用下（xià）,發生（shēng）染色體損傷,從而使（shǐ）受精卵在發育中死亡引（yǐn）起顯性致死的（de）染色體損傷主要（yào）為染色體斷裂。顯性（xìng）致死的主要表現（xiàn）是受精卵著床前丟失或著床後胚

胎早期（qī）死亡。通過（guò）適當（dāng）的途徑使雄性動物接觸受試物（wù）,然後與未（wèi）經染（rǎn）毒且未交配過的雌（cí）性動物交配,交配結束後,取出雌性動物。雌性動物於妊娠後半期處死,剖開腹腔,取出子宮,檢（jiǎn）査兩側子宮內的胚胎植（zhí）入數（著（zhe）床數）、早死胎、晚（wǎn）死胎和活（huó）胎數。雄性動物每間隔一（yī）定時（shí）間再與另一批未經染毒且（qiě）未交（jiāo）配過的雌性動物交配,如此共進行數批,以保證覆蓋一個精子周期。

應用範圍

應（yīng）用於科研、農業、衛生、教育（yù）、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等各個領（lǐng）域

符合標準：

GB/T 15670.18-2017《農（nóng）藥（yào）登記毒理學試驗方法第18 部分:齧齒類動物顯（xiǎn）性致死試驗》

二、試驗流（liú）程

1）實驗動物：

物種: 通常選（xuǎn）用性成熟的健康（kāng）雄性大鼠或小鼠（如SD大鼠、CD-1小鼠（shǔ））

數量: 每組至少15隻雄鼠，設多個劑量組和陰性/陽性對（duì）照組。

雌鼠: 需未交配過的健康雌鼠，用於（yú）與雄鼠交（jiāo）配。

2）給藥劑量（liàng）分組:

至少設3個劑量組，高劑量應出現輕微毒（dú）性（如體重減輕）。

陰性對照組如體重減輕（溶劑對照（zhào））和陽性對照組（如環磷酰胺、絲裂黴素C等已知致突變劑）

給（gěi）藥方（fāng）式:通常為經口灌胃，連續給藥5~7天（覆蓋精子發生周期（qī）不同階（jiē）段）

3）交配程序

交配安排:雄鼠給藥後，按周（zhōu）次與未處理雌鼠交配（每周更（gèng）換一（yī）批雌鼠，共（gòng）5~6批），以覆蓋精子（zǐ）發生全周期（精原細胞一精子）。

交配比例:通常1雄:2雌，每日檢查陰栓（交配證據）

4）觀（guān）察指標：

胚胎存活分析

雌鼠妊娠中期（qī）解剖，計數黃體數、著床數（shù）、活胎數和死胎數。

計算顯（xiǎn）性致（zhì）死率:

其他指標（biāo）: 雄鼠體重（chóng）、睾丸重量、精子質量（liàng）等,

5）結果（guǒ）評價：

陽性結果:顯（xiǎn）性致死率顯著升高（如劑量依（yī）賴性增加，或某批（pī）交配周（zhōu）期異常），提示受試農藥可能誘發生殖細胞遺傳損傷（shāng）。

陰性結果:需結合其他遺傳毒性試驗綜合（hé）評估。